조직배양은 모주의 아주 작은 조각에서 똑같은 대마 식물을 많이 길러 내는 방법입니다. 이 조각은 멸균 용기 안의 영양 젤 위에서 자랍니다. 재배자는 이 방법을 세 가지 목적으로 씁니다. 첫째는 바이로이드와 바이러스 제거입니다. 둘째는 한 재배품종(컬티바)을 균일한 식물 수천 그루로 늘리는 것입니다. 셋째는 모주를 살려 두지 않고도 재배품종을 보관하는 것입니다.
1부에서는 조직배양이 삽목과 어떻게 다른지, 어떤 호르몬이 배양을 조절하는지 설명합니다. 이어서 실제 작업 4단계를 발표된 배합법, 결과와 함께 차례로 살펴봅니다. 2부에서는 바이로이드 감염 제거, 소규모 실험실 꾸리기, 대마에서만 생기는 문제, 보관을 다룹니다. 태국의 더위 속에서 배양실을 운영하는 방법도 함께 다룹니다.
이 글은 원문 기사 하나가 아니라 발표된 연구 8편을 바탕으로 합니다. 연구 목록은 글 끝의 참고문헌에 있습니다. 대괄호 안의 숫자가 해당 연구를 가리킵니다.
1. 조직배양이란 무엇이며, 대마 재배자는 왜 이 방법을 쓰는가
대부분의 재배자는 전통적인 클로닝(삽목)으로 재배품종을 늘립니다. 가지를 잘라 발근 호르몬에 담근 뒤 뿌리가 나기를 기다리는 방식입니다. 수십 년 동안 잘 써 온 방법입니다. 약점은 삽수 하나하나가 모주의 문제를 모두 그대로 물려받는다는 점입니다.
그 문제에는 바이러스와 바이로이드가 포함됩니다. 바이로이드는 바이러스보다도 작은, 감염성을 가진 아주 작은 RNA 가닥입니다. 대마에 가장 큰 피해를 주는 것은 홉 잠재 바이로이드(HLVd)입니다. 삽수는 조직 안에 사는 세균도 함께 옮깁니다.
삽수에서 다시 삽수를 받는 일을 몇 년씩 되풀이하면 작은 유전적 변화도 쌓입니다. 이를 유전적 부동(genetic drift)이라고 하며, 스트레인(품종) 퇴화의 원인 중 하나입니다. 삽수는 이런 변화도 그대로 물려줍니다.
조직배양은 미세번식(micropropagation)이라고도 하며, 훨씬 작은 조각에서 시작합니다. 흔히 생장점 끝(meristem tip), 즉 새순 맨 끝에 있는 생장 지점을 씁니다. 크기가 0.4–0.5 mm밖에 안 될 수도 있습니다. 배양에 넣는 이 조각을 절편체(explant)라고 합니다.
절편체는 빛과 온도를 조절하는 환경에서 멸균 용기 안의 영양 젤 위에서 자랍니다. 절편체 하나에서 유전적으로 똑같은 소식물체(plantlet)를 많이 길러 낼 수 있습니다. 소식물체는 용기 안에서 생기는 작은 식물을 말합니다. 절편체가 충분히 작으면, 소식물체에는 삽수가 옮기는 병원체가 없습니다.
새로운 방법은 아닙니다. Murashige와 Skoog는 1962년에 처음에는 담배 조직용으로 영양 배지를 발표했고, 이 배지는 지금도 기본 배합법으로 쓰입니다 [5]. 바나나, 난초, 감자, 딸기는 수십 년 전부터 이 방법으로 상업적으로 번식해 왔습니다. 대마 재배자들은 비교적 최근에 이 방법을 받아들였는데, 그 이유는 세 가지입니다.
- HLVd가 상업 농장들 사이에 모르는 사이 퍼졌습니다. 대마에서는 2019년 미국 캘리포니아에서 처음 보고되었습니다 [3]. 2023년의 한 리뷰 논문에 따르면 캘리포니아 대마 시설의 약 90%가 양성 판정을 받았습니다. 시설마다 식물의 약 30%에서 증상이 나타났습니다. 이 리뷰는 업계 손실을 연간 최대 40억 미국 달러로 추정합니다 [1].
- 의료용 공급망은 출처 증명을 요구합니다. GACP나 GMP 기준에 맞춰 운영하는 농장은 모든 제품을 모주까지 거슬러 추적할 수 있어야 합니다. GACP(우수농업 및 채집관리기준)는 약용식물 농장에 적용되는 기준입니다. GMP(의약품 제조 및 품질관리기준)는 의약품 제조에 적용되는 기준입니다.
- 대규모 허가 농장에는 물량이 필요합니다. 한 시설에서 재배 주기마다 균일한 식물이 수만 그루 필요할 수 있습니다.
역자 주: 태국에는 이미 난초 등 관상식물을 위한 상업 조직배양 산업이 있습니다. 하지만 깨끗한 대마 소식물체를 판매하거나 대마의 HLVd 검사를 해 주는 실험실이 있는지는 별개의 문제입니다. 저희는 두 서비스 중 하나라도 공개적으로 제공하는 태국 실험실을 찾지 못했습니다. 그런 서비스를 찾기 전까지는 소규모로 직접 작업하거나 모주를 매우 신중하게 관리할 계획을 세우세요.
할 일: 장비를 사기 전에 포럼의 조직배양 게시판에서 물어보세요. 대마 소식물체 구입이나 HLVd 검사를 위해 태국 실험실을 이용해 본 회원이 있는지 확인하는 것입니다. 비용이 얼마였고 기간이 얼마나 걸렸는지도 물어보세요.
2. 삽목과 조직배양 비교
| 전통적인 삽목 | 조직배양 | |
|---|---|---|
| 시작 재료 | 10–15 cm 줄기 삽수 | 0.4–5 mm 생장점 끝, 또는 눈이 붙은 줄기 마디 |
| 병해 | 모주가 가진 것을 모두 옮김 | 바이로이드, 바이러스, 세균 제거 가능 |
| 모주당 생산량 | 1회 작업당 삽수 10–30개 | 절편체 하나에서 소식물체 수백~수천 개 |
| 뿌리 내린 식물이 되기까지 | 10–14일 | 6–12주, 대신 한 번에 많은 식물 |
| 유전적 안정성 | 몇 년에 걸쳐 변화가 쌓임 | 기존 새순에서 새 새순이 자라면 안정적 |
| 공간 | 모주실 | 작은 실험실 |
| 기술 수준 | 초보자 | 중급~고급 |
| 비용 | 최소 | 중간~높음 |
| 장기 보관 | 모주를 계속 살려 둬야 함 | 배양체를 몇 달 동안 보관 가능 |
이 표는 두 도구 중 하나를 고르는 기준으로 보세요. 조직배양이 모든 경우에 삽목을 대신하는 것은 아닙니다. 조직배양은 삽목으로는 풀 수 없는 특정 문제를 해결합니다. 바이로이드·바이러스 제거, 아주 큰 균일 배치 생산, 살아 있는 모주 없이 재배품종 보존이 그것입니다.
역자 주: 태국과 동남아시아에서는 다른 농장에서 삽수를 사서 새 재배품종을 시작하는 재배자가 많습니다. 이것이 점박이응애와 총채벌레, 흰가루병, HLVd를 들여오는 가장 빠른 길입니다. 엉뚱한 스트레인 이름으로 팔린 식물을 받게 될 수도 있습니다. 사 온 삽수는 모주와 떨어진 별도 공간에 두세요. 메인 재배실에 들이기 전에 확대경으로 살펴보세요. 판매자에게 모주가 HLVd 검사를 받았는지, 어느 실험실에서 언제 받았는지 물어보세요.
할 일: 실제로 겪고 있는 문제를 적어 보세요. 바이로이드 증상, 들쭉날쭉한 배치, 비용을 감당하기 어려운 모주실 같은 것들입니다. 해당하는 문제가 없다면 아마 지금도 삽목이 맞는 도구일 것입니다.
3. 미세번식의 생물학적 원리
살아 있는 식물 세포는 모두 식물 전체를 다시 만들 수 있습니다
식물 세포는 전형성능(totipotency)을 가집니다. 살아 있는 식물 세포라면 어느 것이든 완전한 식물을 다시 키우는 데 필요한 유전 정보를 모두 가지고 있다는 뜻입니다. 동물 세포는 발생 초기에 이 능력을 잃습니다. 조직배양이 가능한 이유가 바로 이 전형성능입니다.
호르몬 균형이 알맞은 젤 위에서 식물 조직은 네 방향으로 유도될 수 있습니다. 미분화 세포 덩어리인 캘러스(callus)로 증식할 수 있습니다. 새순을 만들 수도 있고, 뿌리를 만들 수도 있습니다. 고급 작업에서는 종자가 아닌 일반 체세포에서 완전한 배(胚)를 만들 수도 있는데, 이를 체세포배(somatic embryo)라고 합니다.
두 호르몬 그룹이 배양을 조절합니다
배양이 어느 방향으로 갈지는 주로 두 식물 호르몬 그룹의 비율에 달려 있습니다.
| 호르몬 그룹 | 예 | 고농도일 때의 효과 |
|---|---|---|
| 사이토키닌(새순과 눈 형성을 촉진하는 호르몬) | BAP(6-벤질아미노퓨린), 키네틴, TDZ(티디아주론) | 새순이 더 많이 남 |
| 옥신(뿌리 형성을 촉진하는 호르몬, IBA는 삽수용 발근 분말로도 판매됨) | IBA(인돌-3-부티르산), NAA(나프탈렌아세트산), 2,4-D | 뿌리가 더 많이 남 |
- 사이토키닌 높음, 옥신 낮음: 절편체 하나에서 새순이 많이 납니다(증식).
- 사이토키닌 낮음, 옥신 높음: 새순에서 뿌리가 납니다(발근).
- 균형 또는 옥신 높음: 캘러스가 생깁니다.
이 비율은 재배자가 조절하는 가장 중요한 설정값입니다. 비율이 맞으면 새순이 효율적으로 늘어납니다. 비율이 틀리면 캘러스만 생기거나 아예 자라지 않습니다. 대마에서는 캘러스가 다시 새순으로 돌아가는 경우가 드물고, 유전적 위험도 따릅니다(2부 7절).
4절의 배합법은 단계마다 이 원리를 따릅니다.
| 단계 | 사이토키닌 | 옥신 | 비율 |
|---|---|---|---|
| 개시 | 0.5 mg/L BAP | 0.1 mg/L NAA | 5 : 1, 새순 쪽으로 약하게 유도 |
| 증식(BAP 배합) | 1.0–2.0 mg/L BAP | 0.1 mg/L NAA | 10–20 : 1, 새순 쪽으로 강하게 유도 |
| 증식(TDZ 배합) | 0.5 µM TDZ | 없음 | 사이토키닌만 |
| 발근 | 없음 | 2.5 µM IBA | 옥신만 |
유전형이 많은 것을 결정합니다
유전형(genotype)은 특정 재배품종이나 개체가 가진 유전적 구성을 말합니다. 발표된 대마 배합법은 대부분 재배품종 하나를 대상으로 다듬어졌습니다. 다른 유전형은 전혀 다르게 반응할 수 있습니다.
캐나다 겔프 대학교(University of Guelph)의 Monthony 연구팀은 2021년에 대마 조직배양에 관한 리뷰 논문을 발표했습니다 [4]. 이들이 검토한 헴프 연구에서 엽병(잎자루)의 캘러스 형성률은 재배품종에 따라 27%에서 83%까지 차이가 났습니다. 배축(hypocotyl)에서의 재분화율은 원천 조직과 재배품종에 따라 2%에서 71%까지 달랐습니다. 배축은 유묘에서 첫 잎 아래에 있는 줄기입니다.
그러므로 한 재배품종에서 아주 잘 되는 배합법도 다른 재배품종에서는 완전히 실패할 수 있습니다. 이 글의 모든 배합법은 출발점으로만 삼으세요. 그런 다음 직접 키우는 품종에 맞게 조정하세요.
할 일: 새 재배품종마다 먼저 소규모 시험 배치로 배합법을 시험하세요. 규모를 키우기 전에 반응한 절편체가 몇 개인지 세어 보세요.
4. 대마 미세번식의 4단계
0단계: 모주 준비
조직을 떼어 내기 전에 최소 2주 동안 깨끗한 조건에서 모주를 키우세요. 이 기간에는 엽면 살포제나 농약을 전혀 쓰지 마세요. 균형 잡힌 중간 농도의 양액을 주세요. 18/6 광주기(18시간 켜고 6시간 끔)에서 활발한 영양생장 상태를 유지하세요. 목표는 약제 잔류물이 없고 빠르게 자라는 싱싱한 새순을 얻는 것입니다.
가능하면 시작하기 전에 모주의 HLVd 감염 여부를 RT-qPCR로 검사하세요. RT-qPCR은 바이로이드의 유전 물질을 검출하고 그 양을 측정하는 실험실 검사입니다. 검사 결과를 보고 어떤 절편체를 쓸지 정합니다. 깨끗하다고 판정된 모주라면 다루기 쉬운 줄기 마디를 쓸 수 있습니다. 감염되었거나 검사하지 않은 모주라면 생장점 끝을 써야 합니다(1단계).
역자 주: 이 2주 기간 밖에서 모주를 방제할 때는 태국 농업국(กรมวิชาการเกษตร)에 등록된 농약만 쓰세요. 반드시 라벨에 적힌 대로만 사용하세요. 태국 GACP에서 합법적으로 살포할 수 있는 약제를 참고하세요. 태국에서 HLVd 검사를 찾을 수 없다면 모주가 감염되었을 수 있다고 보고 생장점 끝으로 작업하세요.
할 일: 사용할 모주에 표시를 하고, 모든 살포를 멈추고, 날짜를 적어 두세요. 1단계는 그로부터 최소 14일이 지난 뒤에 시작하세요.
1단계: 개시 — 깨끗한 배양 시작하기
가장 중요한 단계이자 가장 자주 실패하는 단계입니다. 목표는 식물 조직 조각을 미생물이 하나도 딸려 오지 않게 멸균 용기로 옮기는 것입니다.
절편체 고르기
- 새순 끝, 즉 생장점은 바이로이드를 없앨 때 쓰는 재료입니다. 자라는 새순 맨 끝의 둥근 부분은 식물의 나머지 부분이 감염되어 있어도 병원체가 없는 경우가 많습니다. 식물 내부의 수송 통로(관다발 조직)가 아직 그 부분까지 자라 들어가지 않았기 때문입니다.
- 캐나다 사이먼프레이저 대학교(Simon Fraser University)의 Punja 연구팀은 잎 원기가 2개 이하인 0.4 mm 크기의 끝을 사용했습니다 [2]. 잎 원기는 나중에 잎이 되는 아주 작은 돌기입니다.
- Adkar-Purushothama 연구팀은 2023년 학술지 Viruses에 실린 리뷰에서 HLVd를 제거하는 방법들을 비교했습니다 [1]. 그 결과 0.5 mm 미만의 끝을 배양하면서 저온 처리를 함께 하는 쪽이 어느 한 방법만 쓰는 것보다 효과가 좋았습니다.
- 이렇게 작은 조직을 자르려면 확대경이나 현미경이 필요합니다.
- 마디 절편(nodal segment)은 잎이 붙은 마디와 그 눈이 포함된 5–10 mm 길이의 줄기 조각입니다. 다루기 쉽고 초보자의 성공률도 더 높습니다. 하지만 바이로이드는 제거하지 못합니다. 모주가 이미 깨끗하다고 판정되었을 때 증식용으로 쓰세요.
절편체 표면 소독(표준 방법)
- 흐르는 수돗물에 5분 동안 헹굽니다.
- 70% 에탄올에 30초 동안 담급니다.
- 1–2% 차아염소산나트륨(가정용 표백제를 약 1:5로 희석)에 Tween-20을 1–2방울 넣고 10–15분 동안 담가 둡니다. Tween-20은 표백제가 표면 전체에 고루 묻도록 돕는 순한 세제입니다.
- 후드나 박스 안에서 멸균 증류수로 3번 헹궈 표백제를 씻어 냅니다.
- 멸균 메스로 최종 크기에 맞게 다듬습니다.
- 개시 배지 위에 올려놓습니다.
역자 주: 태국에서 파는 가정용 표백제는 농도가 제각각입니다. 라벨에서 차아염소산나트륨 함량(%)을 확인하고 1–2%로 희석하세요. 예를 들어 6% 제품을 표백제 1, 물 4의 비율로 섞으면 1.2%가 됩니다. 향이나 증점제가 들어가지 않은 일반 표백제를 쓰세요.
일반적인 개시 배지(MS 기반)
- Murashige & Skoog(MS) 기본 염류와 비타민: 식물 조직용 표준 무기염·비타민 혼합물 [5]
- 30 g/L 자당(일반 설탕, 용기 안에서 조직의 에너지원)
- 0.5 mg/L BAP(사이토키닌)
- 0.1 mg/L NAA(옥신)
- 7 g/L 한천(배지를 굳히는 해조류 기반 젤)
- 오토클레이브(가압 증기 멸균기)나 압력솥으로 배지를 멸균하기 전에 pH를 5.7–5.8로 조정
호르몬은 1 mg/mL 농도의 원액(stock solution)으로 계량하며, 원액은 냉동 보관합니다(만드는 법은 2부 6절). 이 농도라면 배지 1리터에 원액 1 mL를 넣으면 1 mg/L가 됩니다. 따라서 이 배합에는 리터당 BAP 원액 0.5 mL와 NAA 원액 0.1 mL가 필요합니다.
예상되는 결과. 2–4주 안에 절편체가 초록색으로 변하며 자라고, 생장점이나 마디에서 새 잎이 나와야 합니다. 배지가 뿌옇거나 노랗게 변하면 오염된 것입니다. 솜털 같은 것이 자라도 마찬가지입니다. 오염된 용기는 포자가 퍼지지 않도록 작업 공간에서 열지 말고 그대로 버리세요.
이 단계에서 손실이 생기는 것은 정상이며, 손실이 클 수도 있습니다. 층류 후드보다 스틸 에어 박스에서 손실이 더 클 것으로 예상하세요. 스틸 에어 박스(still air box)는 팔을 넣는 구멍이 있는 밀폐된 투명 플라스틱 상자입니다. 층류 후드(laminar flow hood)는 여과된 공기를 작업면 위로 불어 주는 캐비닛입니다. 손실을 미리 계산에 넣어 남겨야 할 배양체 1개당 절편체 10–20개를 시작하세요. 초기에 실패했다고 해서 방법이 안 된다는 증거는 아닙니다.
할 일: 모든 용기에 날짜, 모주, 절편체 종류를 적은 라벨을 붙이세요. 4주째에 깨끗한 용기와 오염된 용기의 수를 세어 보세요. 그러면 계획에 쓸 나만의 손실률을 알 수 있습니다.
2단계: 증식
1단계에서 깨끗하고 잘 자라는 배양체를 얻으면 증식을 시작합니다. 3–4주마다 후드나 박스 안에서 용기를 하나씩 엽니다. 덩어리를 새순 하나씩 또는 작은 덩어리로 나누고, 조각마다 새 배지로 옮깁니다. 이렇게 옮기는 작업 하나하나를 계대배양(subculture)이라고 합니다.
증식 배지(BAP 기반, 범용)
- MS 기본 염류
- 30 g/L 자당
- 1.0–2.0 mg/L BAP(리터당 1 mg/mL 원액 1–2 mL)
- 0.1 mg/L NAA(리터당 원액 0.1 mL)
- 7 g/L 한천
- pH 5.7–5.8
TDZ를 쓰는 대마 배합법(발표된 연구). 가장 많이 인용되는 대마 배합법은 미국 미시시피 대학교(University of Mississippi) 연구팀인 Lata 등(2009)의 것입니다 [6]. 이들은 MS 배지에 0.5 µM 티디아주론(TDZ), 즉 약 0.11 mg/L를 넣었습니다. µM(마이크로몰)은 농도를 무게가 아니라 분자 수로 나타내는 단위입니다.
이 농도에서 절편체의 100%가 반응했고, 절편체당 평균 12.6개의 새순이 나왔습니다.
이 농도가 얼마나 낮은지 눈여겨보세요. TDZ는 아주 강해서 많이 넣는다고 더 잘 되지 않습니다. TDZ가 너무 많으면 유리처럼 투명하고 물에 젖은 듯한 새순이 바로 생깁니다(유리화, hyperhydricity, 2부 7절). 0.11 mL는 재기 어려우니 더 묽은 TDZ 원액을 만드세요. 0.1 mg/mL 원액이라면 리터당 1.1 mL를 넣으면 됩니다.
이 단계에서 쇠퇴하는 배양체가 많습니다. 대부분의 입문 자료는 이 점을 빠뜨립니다. Monthony 연구팀은 1단계 식물에서 가져온 절편체 가운데 재분화한 수가 74–82% 감소했다고 보고했습니다 [4]. 쇠퇴는 유리화된 새순, 원치 않는 캘러스, 그냥 죽어 버리는 배양체로 나타납니다.
대마에서도 증식은 실제로 됩니다. 하지만 엑셀 계산처럼 주기마다 깔끔하게 두 배로 늘지는 않습니다. 이론상의 증식률이 아니라, 여러 주기 동안 내 재배품종이 실제로 보여 준 결과를 바탕으로 계획하세요.
할 일: 재배품종마다 기록지를 한 장씩 만드세요. 계대배양할 때마다 들어간 새순 수와 나온 새순 수를 적으세요. 유리화되거나, 캘러스가 되거나, 죽은 새순 수도 기록하세요.
3단계: 발근
새순이 충분히 모이면 새순을 하나씩 발근 배지로 옮깁니다. 이제 호르몬 균형이 사이토키닌 중심에서 옥신 중심으로 바뀝니다.
발근 배지(Lata 등, 2009) [6]
- MS 염류 1/2 농도
- 500 mg/L 활성탄(갈변 물질과 일부 호르몬을 흡수하는 고운 숯가루)
- 2.5 µM IBA(약 0.5 mg/L, 즉 리터당 1 mg/mL 원액 0.5 mL)
- 사이토키닌 없음
- 7 g/L 한천
- pH 5.7–5.8
이 배합으로 95% 발근에 성공했습니다. 뿌리는 보통 2–3주 안에 나옵니다. 뿌리 길이가 1–2 cm이고 뿌리털이 눈에 보이면 4단계로 넘어갈 준비가 된 것입니다.
대안: 용기 밖에서 발근하기(ex vitro). 발근 배지를 건너뛰는 방법도 있습니다. 증식 배지에서 바로 꺼낸 새순을 발근 호르몬(젤 또는 IBA 분말)에 담급니다. 그런 다음 습도 돔 아래의 멸균 배양토에 꽂습니다. 이렇게 하면 시간과 배지 비용을 아낄 수 있습니다. 대신 환경이 바뀌는 동안 습도와 온도를 더 엄격하게 관리해야 합니다.
역자 주: 용기 밖 발근은 많은 태국 재배자가 이미 하고 있는 클로닝과 비슷합니다. 더운 계절에는 직사광선 아래나 에어컨 없는 방에 둔 돔이 금세 과열될 수 있습니다. 돔은 냉방이 되는 방에 두고, 돔 안에 온도계를 넣어 두세요.
할 일: 한 재배품종의 배치 하나를 두 방법으로 나눠 보세요. 3주 뒤 방법별로 뿌리를 내리고 살아남은 새순 수를 비교하세요.
4단계: 순화(경화, 하드닝 오프)
이 단계에서 식물을 잃는 재배자가 많습니다. 용기 안의 소식물체는 습도가 100%에 가깝고 온도가 일정한 환경에서 살았습니다. 젤 속 당분으로 양분을 얻었고, 공기의 움직임을 느껴 본 적이 없습니다. 갑자기 일반 실내 공기로 옮기면 변화가 너무 크기 때문에 단계적으로 적응시켜야 합니다.
순화 단계
- 소식물체를 꺼내 미지근한 물에서 뿌리에 붙은 한천을 살살 씻어 냅니다. 당분이 든 한천이 뿌리에 남아 있으면 곰팡이의 먹이가 됩니다.
- 미리 적셔 둔 멸균 배양토에 심습니다. 피트와 펄라이트를 70:30으로 섞어 쓰거나 록울을 씁니다.
- 습도 돔 아래 상대습도 90–95%, 22–25 °C, 100–150 PPFD 조건에 둡니다. PPFD는 식물에 닿는, 식물이 쓸 수 있는 빛의 양을 µmol/m²/s 단위로 나타낸 값입니다.
- 1–7일째: 돔을 닫아 둡니다.
- 7–14일째: 돔을 조금씩 열기 시작합니다. 처음에는 1시간, 그다음 2시간, 그다음 4시간 엽니다.
- 14–21일째: 돔을 완전히 치웁니다.
- 4주째부터: 일반 영양생장 조건과 양분 공급으로 전환합니다.
Lata 연구팀은 이런 일반적인 방법으로 뿌리 내린 식물을 흙에서 성공적으로 순화시켰다고 보고했습니다 [6]. 또 캡슐화된 줄기 마디(젤 구슬 안에 봉입한 조각, 2부 8절)에서 다시 키운 식물이 90%의 생존율을 보였다고 보고했습니다 [7]. 이는 잘 다듬어진 방법으로 실험실에서 얻은 결과입니다. 가정에서는 보통 손실이 더 큽니다.
가정에서 생기는 손실은 대부분 모잘록병(댐핑오프) 때문입니다. 모잘록병은 배양토 속 곰팡이와 난균류(물곰팡이)가 일으키는 병으로, 어린 식물의 줄기 밑동이 썩습니다. 가장 중요한 두 가지 대책은 멸균 배양토를 쓰는 것, 그리고 물을 조심스럽게 적게 주는 것입니다.
역자 주: 에어컨이 없는 30–35 °C 방에서는 돔 안을 22–25 °C로 유지하기 어렵습니다. 이 단계는 냉방이 되는 방에서 진행하세요. 우기에는 공기가 이미 습해서 배양토가 더 오래 젖어 있습니다. 건기보다 물 주는 횟수를 줄이세요.
할 일: 배치마다 21일째와 8주째에 살아남은 소식물체 수를 세어 보세요. 잃은 식물마다 원인을 적어 두면 어느 단계를 고쳐야 할지 알 수 있습니다.
대마로 이 단계들 가운데 하나라도 직접 해 보셨다면, 이 토픽 아래에 배합법, 재배품종, 결과 수치를 올려 주세요. 질문도 환영합니다.
참고문헌
- Adkar-Purushothama, C.R., Sano, T., & Perreault, J.-P. (2023). Hop latent viroid: A hidden threat to the cannabis industry. Viruses, 15(3), 681.
- Punja, Z.K., Scott, C., Tso, H.H., Munz, J., & Buirs, L. (2025). Transmission, spread, longevity and management of hop latent viroid, a widespread and destructive pathogen affecting cannabis (Cannabis sativa L.) plants in North America. Plants, 14(5), 830.
- Bektaş, A., Hardwick, K.M., Waterman, K., & Kristof, J. (2019). Occurrence of hop latent viroid in Cannabis sativa with symptoms of cannabis stunting disease in California. Plant Disease, 103(10), 2699.
- Monthony, A.S., Page, S.R., Hesami, M., & Jones, A.M.P. (2021). The past, present and future of Cannabis sativa tissue culture. Plants, 10(1), 185.
- Murashige, T., & Skoog, F. (1962). A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures. Physiologia Plantarum, 15(3), 473–497.
- Lata, H., Chandra, S., Khan, I.A., & ElSohly, M.A. (2009). Thidiazuron-induced high-frequency direct shoot organogenesis of Cannabis sativa L. In Vitro Cellular & Developmental Biology – Plant, 45(1), 12–19.
- Lata, H., Chandra, S., Mehmedic, Z., Khan, I.A., & ElSohly, M.A. (2012). In vitro germplasm conservation of high Δ9-tetrahydrocannabinol yielding elite clones of Cannabis sativa L. under slow growth conditions. Acta Physiologiae Plantarum, 34(2), 743–750. https://doi.org/10.1007/s11738-011-0874-x
- Lata, H., Chandra, S., Techen, N., Khan, I.A., & ElSohly, M.A. (2011). Molecular analysis of genetic fidelity in Cannabis sativa L. plants grown from synthetic (encapsulated) seeds following in vitro storage. Biotechnology Letters, 33(12), 2503–2508.
이 글은 Asiannabis Community 교육 시리즈의 일부입니다. 대마 재배가 허용된 지역에서 합법적인 교육 목적으로만 활용하세요.
2부에서 계속: 대마 조직배양과 미세번식: 홉 잠재 바이로이드 제거, 가정용 실험실, 보관, 열대 환경 (2부)