啤酒花潛隱類病毒(hop latent viroid,HLVd)可以在一個大麻品系裡潛伏好幾年,外觀卻看不出任何症狀。唯一的跡象可能只是效力下降、花苞變小、莖變脆。要確認是否感染,只能靠實驗室檢測。本篇說明該送哪個部位去檢測、RT-PCR 結果代表什麼,以及如何判讀。
本篇也會介紹一項2025年的研究。研究人員嘗試用加熱和組織培養,把類病毒從受感染的品系中清除。成功率因栽培品種 (cultivar) 而異,從100%到0%都有。最後,本篇列出目前沒有發表資料支持的 HLVd 說法,以及這個地區的種植者可以協助解答的問題。
本文為下篇。上篇:https://asiannabis.com/t/1451
先簡單回顧上篇重點。類病毒是一圈裸露的 RNA(遺傳物質),外面沒有蛋白質外殼。在一項2024年的研究中,受感染母株所產的實生苗有84.3%帶有類病毒。把受感染植株的汁液接種到其他植株上,100%都受到感染。濃度約0.8%次氯酸鈉的稀釋漂白水作用2分鐘,就能破壞表面上的類病毒;紫外線、70%酒精和中等程度的加熱都沒有效果。
1. 檢測類病毒:該送哪個部位、如何判讀 RT-PCR 結果
這項檢測測的是什麼
RT-PCR 是「反轉錄聚合酶連鎖反應」(reverse transcription polymerase chain reaction)的縮寫。第一步,實驗室把類病毒的 RNA 轉成對應的 DNA 複本。第二步,實驗室把這段 DNA 中特定的一小段大量複製,讓儀器能夠偵測到。
這項檢測非常靈敏。在一項2024年發表於期刊 Viruses 的研究中(參考文獻1),只要總 RNA 量低至5 pg,就能測出類病毒。一皮克(pg)是一兆分之一公克。RT-qPCR 是這項檢測的另一種版本,還能估算樣本中類病毒 RNA 的含量。
該送哪個部位
送根部。 在一項2025年發表於期刊 Plants 的研究中(參考文獻2),根部在感染後2–3週就呈陽性。葉片要到4–6週後才呈陽性。在扦插繁殖的流程中,這段時間差可能決定你是及早發現感染,還是透過插穗把它擴散出去。如果實驗室要求,也一併附上葉片。
- 從任何一株母株剪取插穗之前,先檢測這株母株。
- 使用任何一株供粉株的花粉之前,先檢測這株供粉株。
- 任何做過清除處理的品系,以及任何新引進的品系,都要再檢測一次。
如何判讀結果
- 陽性: 實驗室在這份樣本中測到類病毒 RNA。請把這株植株視為已感染。停止從它剪取插穗、採集花粉或種子。它接觸過的工具和工作台都要用漂白水清潔。
- 陰性: 實驗室在這份樣本、在這個時間點沒有測到類病毒 RNA。剛發生不久的感染可能還沒擴散到採樣的部位,葉片尤其如此。所以根部是比較好的樣本,之後再檢測一次也很有用。在第2節介紹的清除研究中,研究人員會在第一次檢測後約10週再檢測一次,才判定一個品系已經乾淨。
- RT-qPCR 結果: 請向實驗室問清楚,它如何呈報類病毒的含量,以及陽性和陰性的分界設在哪裡。
- 工作台或工具的擦拭樣本呈陽性: 代表那個表面上有類病毒 RNA。測得到的 RNA 不一定就能感染植株。不過,仍應把這個表面視為已受汙染,並用漂白水清潔。
把樣本送到實驗室
找一間提供 HLVd 專用 RT-PCR 或 RT-qPCR 檢測的實驗室。採樣之前,先問實驗室三件事:需要多少組織、如何包裝和寄送,以及多久能拿到結果。大學的植物病理學系和農業診斷實驗室都是可以詢問的地方。撰寫本文時,沒有找到在泰國或東南亞經過查證的檢測單位,所以這裡沒有列出任何名稱。
寄送前先確認相關規定。大麻植物材料在泰國和其他地方都受到管制。樣本需要跨境寄送時,這一點尤其重要。
譯者註: 在泰國,依據《公共衛生部公告:管控草藥(大麻),佛曆2568年》,大麻花屬於管控草藥。這份公告自2025年6月26日起生效。只寄送根部和葉片,絕對不要寄花。寄送任何東西之前,先問實驗室需要哪些文件。在30–35 °C 的氣溫下,樣本可能在運送途中變質,所以也要問實驗室運送時是否需要冷藏。
行動建議: 在下一輪剪取插穗之前,聯絡一間實驗室,問清楚上面三個問題。然後寄送母株的根部樣本。
2. 清除受感染品系:分生組織培養加上熱處理
這是什麼方法
這個方法結合了兩種技術。熱療法(thermotherapy) 是把植株放在較高的溫度下維持數週。分生組織培養(meristem culture) 是切下分生組織,也就是枝條頂端那個極小的生長點,再把它放進無菌的實驗室容器中培養成新植株。
資料來自一項2025年發表於期刊 Plant Cell, Tissue and Organ Culture 的研究(參考文獻3)。正式發表的論文涵蓋十三個栽培品種,並指出成功率因品種而異。下方各栽培品種的數據,來自同一項研究在2024年發布的預印本。預印本是論文在經過其他科學家審查之前,先在網路上公開的早期版本。
預印本所描述的步驟
- 把組織培養小苗放在 28–30 °C 下維持4–5週。
- 切下分生組織,並在 2–3週 內誘發新芽。
- 新芽生長約 8週。
- 檢測植株。
- 約 10週後再檢測一次,確認仍為陰性。
把這些步驟加起來,到第一次檢測大約需要14–16週。要得到一個確認乾淨的品系,大約需要六個月。
| 栽培品種 | 清除率(首次檢測) |
|---|---|
| Valarie | 100% |
| Athena | 94% |
| FRB1.4 | 69% |
| AnnaLee | 62% |
| Wife | 50% |
| Hybrid 9 | 26% |
| Hybrid 5 | 14% |
| EarlyPearly | 14% |
| Abigail | 3% |
| S1-4 | 2% |
| River Rock | 0% |
| Pure CBG | 0% |
存活率: 預印本指出,整體而言有超過70%的小苗撐過了熱處理。目前能取得的版本沒有提供各栽培品種的存活率。
這些結果代表什麼
同一個方法、同一間實驗室,清除率從100%到0%都有。在有呈報清除率的十二個栽培品種中,有四個的清除率只有3%或更低。這些栽培品種大多是北美品系。沒有找到這個地區所種植栽培品種的已發表清除率,所以 你無法查到自己的栽培品種有多少機會成功。
清除品系,還是換掉它?
在這樣的成功率下,首先要決定的是清除這個品系,還是換掉它。如果是一個很有價值、無可取代的品系,花六個月做一次結果不確定的嘗試,可能值得。否則,換成檢測為陰性的種子,或換成同一基因來源、且檢測為陰性的材料,通常比較快。
提供清除服務的實驗室,應該把它當作一次結果不確定的嘗試來定價,而不是保證成功的服務。清除後的小苗不帶類病毒,但並不具有抵抗力。只有上篇介紹的清潔流程,才能讓它們保持乾淨。
熱帶條件。 28–30 °C 的加熱步驟,和泰國許多地區平常的氣溫差不多,所以加熱本身在這裡並不難。難的是在潮濕的氣候中維持組織培養實驗室的無菌狀態,因為黴菌和細菌汙染的風險始終存在。組織培養與微體繁殖主題說明了無菌操作技術。
譯者註: 對種植者來說,這個方法提供了一個機會,讓原本只能丟掉的稀有品系有機會保留下來。撰寫本文時,沒有找到在泰國或東南亞提供大麻品系 HLVd 清除服務的實驗室。如果你找不到,目前實際可行的做法是換成檢測為陰性的種源。在此同時,把受感染的母株隔離,不要再從它繁殖。
譯者註: 如果你或實驗室要嘗試這個方法,請事先規劃停電對策。熱季時一停電,密閉房間可能在幾小時內就超過28–30 °C 的範圍。停電也會讓無菌操作台(clean bench)停止運作。請記錄室溫,並把溫度控制器和無菌操作台接上 UPS(不斷電系統,停電時自動接手供電的電池)。雨季時汙染會更多,請多準備一些小苗,以彌補損失。
行動建議: 依價值列出你所有的品系。針對每個受感染的品系,決定要換掉還是嘗試清除。如果要嘗試,先從單一品系的一小批次開始,在處理前後各檢測一次,並在約10週後再檢測一次。
3. 無法查證的 HLVd 說法
「加州90%的種植場都有啤酒花潛隱類病毒。」 這個數字被廣泛轉述。一篇產業媒體文章引用了超過200,000次組織檢測,還加上一個加拿大診斷機構「大約四分之一的樣本」的數字(參考文獻4)。這篇文章沒有提供正式出處,背後的資料也屬於檢測實驗室所有。類病毒的生物學已有大量發表的研究,但這個醒目的盛行率數字並沒有。
泰國與東南亞的盛行率。 沒有找到這個地區任何已發表的調查、檢測計畫或感染率。沒有資料,並不代表這個病原不存在。
在熱帶高溫下的表現。 沒有找到任何研究探討高氣溫如何影響類病毒在植株內的擴散。有研究發現,類病毒在12小時光照下比在24小時光照下擴散得更快,但這項研究沒有確定原因。
行動建議: 看到任何 HLVd 盛行率數字時,先問它來自哪一項研究。引用參考文獻清單中的研究,而不是新聞稿。不要因為沒有在地資料,就認定你的種植場沒有 HLVd。去檢測。
4. 這裡的種植者可以查明什麼
以下四個問題,可以看出 HLVd 在泰國與東南亞是否構成問題:
- 這個地區有人檢測過嗎? 只要有少數幾筆來自在地種植場的結果,不論陽性或陰性,都會是最早的在地資料之一。
- 有沒有人把大麻種在番茄或小黃瓜旁邊,而且兩者共用工具或工人? 2024年針對其他寄主植物的實驗室結果顯示,這件事值得了解,雖然目前還沒有證實會在田間傳播。
- 有沒有人主要用紫外線消毒箱來消毒工具? 根據2025年的資料,這種做法需要更換,而漂白水是便宜的解決辦法。
- 有沒有人在本地嘗試過分生組織清除? 只要有一筆結果,不論成功或失敗,並註明栽培品種,就會是這個地區第一筆這類資料。
如果一個品系經過幾代慢慢變差,效力下降、花苞變小、莖變脆,卻看不到任何可以拍照的症狀,請先檢測 HLVd,再去怪肥料或基因。
請在本主題下方貼出你的檢測結果,不論陽性或陰性,並註明送檢的組織部位。 目前沒有找到東南亞 HLVd 感染的任何已發表資料。這個論壇只要累積十幾筆結果,就會是判斷這個病原是否已在這裡出現的最佳資訊之一。
本論壇相關文章:母株與無性繁殖;種子與花粉的保存;製作雌性種子;表現型篩選 (phenohunting);根腐病、腐黴菌(Pythium)與鐮刀菌(Fusarium)。
參考文獻
- Atallah OO, Yassin SM, Verchot J. New insights into hop latent viroid detection, infectivity, host range, and transmission. Viruses 2024; 16(1):30. https://doi.org/10.3390/v16010030
- Punja ZK, Scott C, Tso HH, Munz J, Buirs L. Transmission, spread, longevity and management of hop latent viroid, a widespread and destructive pathogen affecting cannabis (Cannabis sativa L.) plants in North America. Plants 2025; 14(5):830. https://doi.org/10.3390/plants14050830
- Torres A, et al. Differential gene expression analysis of Cannabis sativa following hop latent viroid (HLVd) eradication therapy in micropropagation tissue culture. Plant Cell, Tissue and Organ Culture 2025; 161:66. https://doi.org/10.1007/s11240-025-03057-8 ;含各栽培品種數據的預印本:bioRxiv 2024, https://doi.org/10.1101/2024.04.06.588422
- MMJ Daily. Hop latent viroid: a global threat to cannabis cultivation. 產業媒體文章;其中的盛行率數字未經查證。https://www.mmjdaily.com/article/9786670/hop-latent-viroid-a-global-threat-to-cannabis-cultivation/
本文是植物栽培的技術資訊,提供給在所在地合法經營的讀者參考。各國對大麻種植的管制方式都不相同。在泰國,大麻花依據公共衛生部的規定屬於管控草藥,販售或加工都需要取得許可。本文內容不構成法律建議,也不是診斷。只有實驗室檢測才能確認這個病原。